AAT Bioquest丨艾美捷代理PowerStyramide信号放大（PSA）技术说明

AAT Bioquest-PowerStyramide信号放大（PSA）是一种新型酶促放大技术，用于检测细胞和组织中的低丰度靶标。该技术将iFluor染料卓越的亮度与光稳定性，与多聚HRP介导的Styramide放大系统相结合，产生的荧光信号在精度和灵敏度上均显著优于传统免疫组化、免疫细胞化学及原位杂交技术（提升超100倍）。艾美捷作为AAT Bioquest中国区代理商，分析一下其技术优势和多重分析应用：

技术原理

PSA技术与酪酰胺信号放大（TSA）类似，均利用辣根过氧化物酶（HRP）作为报告酶，催化标记Styramide底物在靶蛋白或核酸序列原位的共价沉积。在过氧化氢存在下，HRP将标记Styramide转化为高反应性、短寿命的自由基，这些自由基可快速与酶位点及其邻近的酪氨酸残基结合。Styramide自由基的反应活性显著高于酪酰胺自由基，使得PSA成像较传统TSA标记更快、更稳定且更灵敏。由于标记Styramide集中沉积在HRP靶点周围，有效避免了扩散导致的分辨率损失。该技术可灵活应用于任何可整合HRP的实验方案，包括IHC、ICC、IF、原位杂交及ELISA等。

图：PSA检测方法在靶抗原免疫标记中的示意图：通过传统检测方法，使用未标记一抗与HRP标记二抗处理细胞或组织样本；HRP催化标记Styramide转化为高反应性自由基，并共价结合于酶位点及邻近酪氨酸残基。

技术优势

PSA成像系统通过每个HRP标记快速催化并共价沉积多个Styramide底物，实现信号放大，具有以下显著优势：

-超敏检测：对低丰度靶标的检测灵敏度较传统IHC/ICC/IF方法提升超100倍

-高强度信号：荧光强度达到酪酰胺信号的10-50倍

-多重兼容性：可与其他荧光标记物、染色技术及PSA成像试剂盒联用，实现多重分析

-高效反应：PSA自由基更高反应活性，可在保证灵敏度与分辨率的同时加速实验进程

-抗体节约：显著降低一抗用量即可达到同等检测灵敏度

-操作便捷：试剂盒提供100次测试用量，无需复杂操作流程

灵敏度提升实践

在免疫染色应用中，PSA成像技术允许在保持检测灵敏度的前提下显著提高一抗稀释倍数。这不仅降低了非特异性背景信号，还能克服因固定效果不佳或靶标表达量过低导致的标记不充分问题。

多重分析应用

PSA系统专为多重检测设计，可与其他荧光标记物、细胞组织染色技术及其他PSA成像试剂盒兼容，实现多靶标同步可视化。相较于TSA和荧光二抗，PSA更低的检测阈值使得即使使用同一宿来源的两种一抗，也能在避免信号串扰的前提下实现双靶标检测。其兼容范围包括：

-荧光标记物与复染剂（如DAPI,Hoechst）

-荧光蛋白（如GFP,YFP,RFP）

-其他Styramide试剂与PSA成像试剂盒

-酪酰胺试剂及其成像试剂盒

灵活的工作流程适配性

PSA成像技术可适配任何支持HRP整合的实验方案，并与免疫应用中常见的样本类型及荧光成像平台兼容。当与传统IHC、ICC、原位杂交及流式细胞术结合时，可在不损失图像分辨率或不增加背景噪声的前提下显著提升检测灵敏度。

PSA标准操作流程

1.样本预处理：对细胞或组织样本进行固定、透化及封闭处理

2.一抗孵育：与未标记一抗、生物素化一抗或生物素化核酸探解育

3.HRP标记：加入HRP标记二抗或HRP-链霉亲和素复合物

4.信号放大：加入iFluor®染料标记Styramide工作液，进行HRP催化沉积

5.信号检测：封片后通过相应成像系统进行信号采集

该技术通过优化信号放大机制，为生命科学研究提供了更高效、更精准的低丰度靶标检测解决方案。

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